基本概念
1.消毒：消毒是指杀灭物体上病原微生物的方法，但并不一定能杀死含芽孢的细菌。
2.灭菌：灭菌是指杀灭物体上所有病原微生物和非病原微生物及其芽孢的方法。
3.无菌：无菌是指物体上、容器内或特定的操作空间内没有活微生物的状态。防止任何微生物进入动物机体、特定操作空间或相关物品的操作技术称无菌操作。
4.防腐：防腐是指阻止或抑制物品上微生物生长繁殖的方法，微生物不一定死亡。用于防腐的化学药物称防腐剂。
物理消毒灭菌法
1.热力灭菌法
（1）湿热灭菌法
①高压蒸汽灭菌法。使用密闭的高压蒸汽灭菌器，当加热产生蒸汽时，随着蒸汽压力的不断增加，温度也会随之上升。当压力在103.4 kPa时，容器内温度可达121.3C，在此温度下维持15~30min可杀死包括芽孢在内的所有微生物。此法适用于耐高温和不怕潮湿物品的灭菌，如培养基、生理盐水、玻璃器皿、塑料移液枪头、手术器械、敷料、注射器、使用过的微生物培养物、小型实验动物(如小鼠)尸体等。
②煮沸法。100°C 煮沸5min可杀死细菌的繁殖体。常用于消毒食具、刀剪、注射器等。
③流通蒸汽法。是利用蒸笼或蒸汽灭菌器产生100°C的蒸汽，30min可杀死细菌繁殖体，但不能杀死其芽孢。常用于不耐高温的营养物品，如含糖或含血清培养基的灭菌。
④巴氏消毒法。可分为三类:第一类为低温维持巴氏消毒法，在63~65°C保持30min;第二类为高温瞬时巴氏消毒法，在71~72°C保持15s;第三类为超高温巴氏消毒法，在132C保持1~2s，加热消毒后应迅速冷却至10°C以下，称为冷击法，这样可进一步促使细菌死亡，也有利于鲜乳等食品马上转入冷藏保存。
(2)干热灭菌法
①火焰灭菌法。以火焰直接烧灼杀死物体中全部微生物的方法，分为灼烧和焚烧两种。灼烧主要用于耐烧物品，直接在火焰上烧灼，如接种针(环)、金属器具、试管口等的灭菌;焚烧常用于烧毁的物品，直接点燃或在焚烧炉内焚烧，如传染病畜禽及实验感染动物的尸体、病畜禽的垫料以及其他污染的废弃物等无害化处理。
②热空气灭菌法。利用干烤箱灭菌，以干热空气进行灭菌的方法。加热至160~170C，维持2h才能杀死包括芽孢在内的一切微生物。适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品，如玻璃器皿、瓷器或需干燥的注射器等。
2.辐射灭菌法
(1)紫外线：紫外线以265 ~ 26m波长的紫外线杀菌能力最强，杀菌原理是:在DNA吸收紫外线后，一条链上相邻的两个胸腺嘧啶通过共价键结合形成嘧啶二聚体，干扰DNA复制与转录时的正常碱基配对，导致细菌死亡或变异。此外，紫外线还可使空气中的分子氧变为臭氧，臭氧放出氧化能力强的原子氧，也具有杀菌作用。紫外线穿透力弱，常用于微生物实验室、无菌室、养殖场入口的消毒室、手术室、传染病房、种蛋室等的空气消毒。
(2)电离辐射：X射线、Y射线等可将被照射物质原子核周围的电子击出，引起电离，故称电离辐射。有较高的能量与穿透力，因而可产生较强的致死效应，可在常温下对不耐热的物品进行灭菌。故又称“冷灭菌”。其机制在于产生游离基，破坏DNA.使细菌死亡或发生突变。常用于大量一次性医用塑料制品的消毒，也可用于食品的消毒而不破坏其中的营养成分。
2.滤过除菌法：滤过除菌法是利用物理阻留的方法，通过含有微细小孔的滤器将液体或空气中的细菌除去，以达到无菌的目的。不耐热的血清、抗毒素、抗生素、药液等液体的除菌现在多用可更换滤膜的滤器或一次性滤器，其孔径为0.22 ~0.45pum,一般不能除去病毒、支原体等。空气过滤器可进行超净工作台、无菌隔离器、无菌操作室、实验动物室以及疫苗、药品、食品等生产中洁净厂房的空气过滤除菌，一般由不同孔径过滤效率(O,45~5pum)的滤芯构成，以便达到特定净化级别的要求。
化学消毒灭菌法
1.常用消毒剂的种类及应用:消毒剂的种类很多，其杀菌作用亦不相同，总体上可概括为三种作用机制:①使菌体蛋白质变性或凝固。②干扰或破坏细菌的酶系统和代谢。③改变细菌细胞壁或细胞膜的通透性。常用化学消毒剂有如下主要类型:
(1)含氯消毒剂:常用无机氯化合物消毒剂，含氯消毒剂可杀灭各种微生物，包括细菌繁殖体及其芽孢、病毒、真菌等。常用于环境、物品表面、饮用水、污水、排泄物、垃圾等的消毒。畜禽饮用水根据水源不同，有效氯含量要求在0.6~ 4mg/L,地面环境或物体表面可用1%~3%的漂白粉溶液喷洒，粪便等排泄物消毒可按5份干粪加1份漂白粉搅匀放置2h,杀灭病毒可选用有效氯1000mg/L作用30min。
(2)过氧化物类：具有强氧化能力，优点是消毒后在物品上不留残余毒性，但由于化学性质不稳定，故须现用现配，使用不方便，且因其氧化能力强，高浓度时可刺激、损害皮肤黏膜，腐蚀物品。
(3)酚类：常用的有煤酚皂(又名来苏儿)，其主要成分为甲基苯酚。卤化苯酚可增强杀菌作用，如三氯羟基二苯醚。酚类可杀灭细菌、霉菌和病毒，主要用于畜舍、笼具、场地、车辆的消毒。
(4)碱类：常用的有氢氧化钠(烧碱)和生石灰。烧碱能破坏病原体的酶系统和菌体结构，从而起到消毒作用。2%水溶液能杀灭细菌繁殖体和病毒，4%溶液45min能杀灭芽孢。一般配成20%的石灰乳涂刷厩舍墙壁、畜栏及地面消毒等。
(5)醛类：主要是甲醛，对细菌繁殖体、芽孢、真菌和病毒均有效。消毒方法一是熏蒸消毒，适用于室内、器具的消毒，每立方米空间用甲醛溶液20mL加等量水，然后加热使甲醛变为气体熏蒸消毒，温度应不低于15°C，相对湿度60%~ 80%，消毒时间为8~10h;二是用2%水溶液用于地面消毒，每100m2用量为13mL。对人有一定的刺激性，使用时要注意防护。
(6)醇类：最常用的是乙醇，可凝固蛋白质，导致微生物死亡，属于中效消毒剂，可杀灭细菌繁殖体和多数亲脂性病毒，对芽孢无效。醇类杀微生物作用亦可受有机物影响，而且由于易挥发，应采用浸泡消毒，或反复擦拭以保证其作用时间。醇类常作为某些消毒剂的溶剂，而且有增效作用，常用浓度为75%。
(7)含碘消毒剂：包括碘酊和碘伏，能使细菌蛋白质氧化变性，破坏细菌胞膜的通透性屏障，使菌体蛋白质漏出而失活。可杀灭细菌繁殖体、真菌和部分病毒，主要用于皮肤消毒。碘酊的一般使用浓度为2%，碘伏使用浓度为0.3%~0.5%。
(8)季铵盐类：属于阳离子表面活性剂，能吸附带负电荷的细菌，破坏其细胞膜，导致菌体自溶死亡。具有杀菌和去污作用，使用浓度为0.1%~0.2%，一般用于非关键物品的清洁消毒，也可用于手消毒，将其溶于乙醇可增强其杀菌效果用于皮肤消毒。
2.影响消毒剂作用的因素
①消毒剂的性质、浓度和作用时间一般而言，消毒剂浓度越高，作用时间越长，杀菌效果就越好。
②温度和酸碱度升高温度可提高消毒剂的杀菌效果，温度每增高10°C，石炭酸的杀菌作用增加5~8倍。
④有机物环境中有机物能够影响消毒剂的效果。病原菌常随同排泄物、分泌物一起存在，这些物质可阻碍消毒剂与病原菌的接触，对细菌有保护作用，并与消毒剂发生化学反应，从而降低消毒剂的作用效果。
本期题
1.采用0.22um孔径滤膜过滤小牛血清的目的是（）
A.防腐B.消毒C.抑菌D.除菌E.杀菌
2.种蛋室空气消毒常用的方法是（）
A.紫外线B.a射线C.β射线D.γ射线E.X射线
3.动物手术室空气消毒常用的方法是（）
A.电离辐射B.紫外线C.滤过除菌D.甲醛熏蒸E.消毒药水喷
